Efecto citotóxico de una mezcla de compuestos derivados de la industria del corcho tratada mediante ozonización

Autores UPV
Año
CONGRESO Efecto citotóxico de una mezcla de compuestos derivados de la industria del corcho tratada mediante ozonización

Abstract

Se ha evaluado la citotoxicidad de una mezcla de ocho compuestos derivados de la industria del corcho (2,4-dinitrofenol y los ácidos gálico, elágico, tánico, siríngico, sinápico, protocatecuico y vanílico), antes y después de ser sometida a un tratamiento de ozonización, con el fin de valorar la eficacia de dicho tratamiento en la reducción de la toxicidad. Para ello, se han seleccionado tres líneas celulares: 3T3 fibroblastos de tejido embrionario de ratón, N2a neuroblastos de ratón, HEK células embrionarias de riñón humano. Previamente a la realización del ensayo, las muestras han sido concentradas mediante vacío a través de cartuchos SPE. El extracto seco obtenido se ha reconstituido en un volumen final de 500 µL de metanol. Para el mantenimiento de las células y para el ensayo de citotoxicidad se ha utilizado medio DMEM suplementado con suero fetal bovino, penicilina/estreptomicina y L-glutamina. En todos los casos las células han crecido en condiciones controladas (37 ºC y 5% CO2). El ensayo de citotoxicidad se realiza en placas transparentes y con fondo en U, de 96 pocillos, tratadas para el cultivo de células. En primer lugar, las células se incuban en medio DMEM durante 24 horas; a continuación, se añaden las muestras y sus diluciones, las placas son incubadas durante 24 horas más y, finalmente, se añade resazurina que es metabolizado por las células vivas a otro compuesto, resorufina. La viabilidad celular se mide a las 3 horas mediante la medida de la fluorescencia de dicho metabolito (Ex560/Em590), tomando como referencia el crecimiento de los controles (100% viabilidad). Los resultados indican que ninguna de las muestras ensayadas afecta a la viabilidad de las líneas celulares 3T3 y HEK, a las concentraciones estudiadas. En cambio, sí se ve afectada la línea celular N2a, observándose una disminución de la citotoxicidad a medida que aumenta el tiempo de tratamiento de ozonización.