Sonda fluorescente para la detección rápida de sepsis basada en la actividad de neutrófilo elastasa NE

La presente invención se centra en una sonda molecular fluorescente activable, denominada NB-NE, diseñada para la detección rápida y específica de sepsis a través de la medición de la actividad de la elastasa de neutrófilos NE, un biomarcador clave de la respuesta inmune exacerbada característica de esta patología. La sonda está compuesta por el fluoróforo Azul de Nilo unido a un grupo reconocedor específico 2,2,3,3,3-pentafluoropropanamida para NE, lo que permite que, en condiciones normales, la señal fluorescente sea baja, y que se incremente significativamente cuando la sonda es hidrolizada por la actividad proteolítica de la elastasa presente en muestras biológicas. Otra ventaja adicional de este sistema de detección es el uso del fluoróforo NB. El NB es un compuesto comercialmente disponible y de bajo costo, que presenta un espectro de excitación y emisión en la región del infrarrojo cercano NIR. Esta propiedad resulta especialmente favorable para aplicaciones en muestras y tejidos biológicos, ya que reduce significativamente la interferencia causada por la autofluorescencia endógena, común en otras regiones del espectro visible. La tecnología desarrollada permite una rápida detección en tan solo 60 minutos mediante la activación enzimática de la sonda, con alta especificidad y sensibilidad demostrada en ensayos in vitro y en muestras biológicas, incluyendo líneas celulares con diferente expresión de NE y suero humano. Además, el sistema ha sido validado en muestras clínicas de pacientes con sepsis, mostrando una clara diferenciación con controles sanos, y se ha desarrollado un prototipo preliminar para su uso en formato de tiras reactivas con lectura mediante smartphone, facilitando así su implementación en entornos clínicos y de atención primaria, incluso en regiones con recursos limitados. El desarrollo de esta sonda supone una herramienta innovadora para el diagnóstico rápido de sepsis, superando las limitaciones de los métodos convencionales basados en parámetros clínicos inespecíficos o en técnicas analíticas complejas y lentas. Su aplicabilidad abarca desde hospitales hasta entornos ambulatorios y puede contribuir significativamente a mejorar la detección temprana, la clasificación y el manejo clínico de pacientes con sepsis, aumentando así las probabilidades de supervivencia mediante intervenciones oportunas.